多色熒光技術mFISH 小常識
日期：2025-05-07 01:55
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摘要：
mFISH顧名思義是多色FISH multi-coclour FISH或multiplex FISH, M-FISH 是在單色FISH基礎上發展起來的多色FISH技術。該技術采用兩種以上熒光標記DNA探針與靶細胞中期染色體或間期細胞核雜交后（可選用美國自然基因有限公司提供的Thermobrite-NatureGene雜交儀），用IMSTAR**熒光檢測系統進行雜交信號的檢測與放大，通過兩種或多種不同濾光片組合或特制的一種濾光片觀察，雜交信號呈現出不同的顏色。顏色取決于標記物連接的熒光物質和復染染料的不同。例如，連接物有AMCA（藍色）FITC或dibopy（綠色）rhodamine 或Texas red（紅色）復染的熒光染料有PI（紅色）DAPI（藍色）quinacrine(綠色)等。Dauwerse等采取結構標記（combination labelling）或比率標記(ratio lablling）的策略，以biotin digoxigeinh和FITC標記探針，不同比例混合后進行雜交，同時觀察12種不同顏色的雜交結果。多色FISH技術可同時觀察兩種以上DNA探針的雜交信號，是研究幾種不同探針之間關系的理想手段，如檢測靶序列擴增水平，染色體微小缺失和染色體易位攜帶者。多色FISH還適用于診斷不同染色體區域的結構異常或同時存在的幾種染色體數量異常。